赛智科技应用检测部参考中国农业行业标准（NY/T 1372-2007），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪经实践检测可提供饲料中三聚氰胺的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、植物性蛋白饲料、宠物饲料（干粮、罐头）中三聚氰胺的测定，仅供广大用户参考。

　　以下是饲料中三聚氰胺的测定的详细检测方法。

1仪器与试剂

1.1 仪器
　LC-10Tvp高效液相色谱仪
　Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm
　超声波清洗器
　涡旋混合器
　离心机：10，000r/min
　氮吹仪，可控温至60℃
　固相萃取装置
　高速匀质器
　索氏提取器
　震荡摇床

1.2 试剂
    甲醇，色谱纯。
    乙腈，色谱纯。
    氨水。
    混合型阳离子交换固相萃取柱。
    氨水甲醇溶液。
    乙酸铅溶液。
    滤膜，0.45μm，有机相。
    甲醇溶液。
    庚烷磺酸钠。
    柠檬酸。
    三聚氰胺标准品：纯度≥99%。

2 试样溶液的制备

2.1 提取
　　配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、植物性蛋白饲料、宠物饲料（干粮）中三聚氰胺的提取。称取试样适量，准确加入三氯乙酸溶液，再加入乙酸铅溶液。摇匀，超声提取。静置，取上层提取液转入离心管，在10,000r/min离心机上离心。
宠物饲料（罐头）中三聚氰胺的提取。称取试样适量，加入乙醚，摇床上120r/min振荡，弃去乙醚，再加入乙醚，摇床上120r/min振荡，弃去乙醚，其余步骤同上。

2.2 净化
　　分别用甲醇，水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，准确移取离心液分次上柱，控制过柱速度在1mL/min以内。再用水和甲醇洗涤混合型阳离子交换固相萃取柱，抽近干后用氨水甲醇溶液洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，准确加入甲醇溶液，涡旋振荡1min，过0.45μm滤膜，上机测定。

3 色谱条件
   色谱柱：Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm；
   流动相：庚烷磺酸钠+柠檬酸+乙腈；
   流速：1.0mL/min;
   温度：室温；
   检测波长：240nm；
   进样量：20μL。

4 三聚氰胺标准品色谱图

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