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M314145 大鼠内皮素-1（rat ET-1）elisa试剂盒
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公司名称：
北京中西远大科技有限公司成都办事处
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参考价格：
未标明
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发布时间：
2010-11-22
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| 产品描述： |
| 大鼠内皮素-1（rat ET-1）elisa试剂盒
本试剂盒仅供研究研究使用
预期应用
ELISA法定量测定大鼠血浆或其它相关液体中内皮素含量。
概述
内皮素是一种由21个氨基酸组成的活性多肽，为目前已知缩血管活性最强的物质。在生理状态下，由于内皮细胞合成内皮素很少且清除速度快，故血浆中内皮素浓度很低。 但在内皮细胞损伤、组织缺血缺氧等情况下，内皮细胞大量合成内皮素并释放入血，成为参与疾病病理生理过程的重要体液因素。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中内皮素水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素、生物素化的抗大鼠内皮素抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成
1. 酶联板：一块（96孔）
2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，其浓度为120pg/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成120 pg/mL，60 pg/mL ，30 pg/mL，150pg/mL，7.5pg/mL，3.8 pg/mL，1.9 pg/mL，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/mL，临用前15分钟内配制。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
标本的采集及保存
血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
各试剂在使用前平衡至室温。
7. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外，余孔分别加标准溶液或待测样品100ul，轻轻混匀，37℃，120分钟。
8. 弃去液体，甩干，不用洗涤。
9. 每孔加检测溶液A工作液 100ul，37℃,60分钟。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
10. 每孔加检测溶液B工作液 100ul，37℃，60分钟，洗板5次，甩干。
11. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色30分钟。
12. 依序每孔加终止溶液50ul，终止反应。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
注：
1． 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
2．为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层
吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的大鼠内皮素，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
3 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
4 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
5 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
6 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
5．在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
6．底物请避光保存。
检测范围：
0.5 pg/mL -300 pg/mL
说明
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．有效期：6个月
3．浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
5．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
6.本试剂盒的最终解释权归中西公司
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M314145 大鼠内皮素-1（rat ET-1）elisa试剂盒的详细介绍
大鼠内皮素-1（rat ET-1）elisa试剂盒
本试剂盒仅供研究研究使用
预期应用
ELISA法定量测定大鼠血浆或其它相关液体中内皮素含量。
概述
内皮素是一种由21个氨基酸组成的活性多肽，为目前已知缩血管活性最强的物质。在生理状态下，由于内皮细胞合成内皮素很少且清除速度快，故血浆中内皮素浓度很低。 但在内皮细胞损伤、组织缺血缺氧等情况下，内皮细胞大量合成内皮素并释放入血，成为参与疾病病理生理过程的重要体液因素。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中内皮素水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素、生物素化的抗大鼠内皮素抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成
1. 酶联板：一块（96孔）
2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，其浓度为120pg/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成120 pg/mL，60 pg/mL ，30 pg/mL，150pg/mL，7.5pg/mL，3.8 pg/mL，1.9 pg/mL，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/mL，临用前15分钟内配制。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
标本的采集及保存
血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
各试剂在使用前平衡至室温。
7. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外，余孔分别加标准溶液或待测样品100ul，轻轻混匀，37℃，120分钟。
8. 弃去液体，甩干，不用洗涤。
9. 每孔加检测溶液A工作液 100ul，37℃,60分钟。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
10. 每孔加检测溶液B工作液 100ul，37℃，60分钟，洗板5次，甩干。
11. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色30分钟。
12. 依序每孔加终止溶液50ul，终止反应。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
注：
1． 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
2．为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层
吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的大鼠内皮素，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
3 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
4 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
5 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
6 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
5．在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
6．底物请避光保存。
检测范围：
0.5 pg/mL -300 pg/mL
说明
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．有效期：6个月
3．浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
5．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
6.本试剂盒的最终解释权归中西公司
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