近日，台湾“毒淀粉”事件愈演愈烈，广大民众陷入“毒食”恐慌。所谓“毒淀粉”，主要是指在淀粉中添加了顺丁烯二酸酐。顺丁烯二酸酐(Maleic anhydride)简称马来酸酐或失水苹果酸酐，遇水即水解成顺丁烯二酸(又称马来酸)。加入淀粉后可增加食物的弹性、黏性及外观光亮度，但会对人体肾脏造成极大损伤。目前，我国国家标准GB 2760－2011未将顺丁烯二酸酐列为食品添加剂。
 

赛智推出淀粉中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐的高效液相检测方法

 针对毒淀粉事件，赛智科技参考国标（GB/T 23296.21-2009），利用高性能LC-10Tvp高效液相色谱仪，来测定淀粉中的顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐，该方法灵敏度高，准确性好，供广大用户参考。

以下是高效液相色谱仪测定淀粉中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐的详细检测方法。

1　 仪器与试剂
1.1 仪器设备
　  LC-10Tvp高效液相色谱仪
　　Vertex 色谱柱：150mm×4.6mm×5μm
　　分析天平
　　超声波水浴
　　离心机 
    比色管
    针头过滤器

1.2 试剂
乙醇
乙腈
磷酸
十六烷基三甲基溴化铵
顺丁烯二酸标准溶液

2  试样溶液的制备
称取2.50 g淀粉样品(精确至0.01 g)于50 mL比色管中(淀粉制品用粉粹机磨碎后称取)，加入25 mL乙醇-水（5:95，v:v）混合溶液，涡旋2min，超声提取20 min后用乙醇-水混合溶液定容至50 mL，摇匀，8000 r/min离心5 min，取上清液过0.45μm微孔滤膜，供高效液相色谱分析用。

3　 色谱条件
　　色谱柱：Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm；
　　流速：1.0mL/min；
　　温度：30℃；
　　进样量：10μL；
　　检测波长：220nm。
　　流动相：乙腈-十六烷基三甲基溴化铵磷酸缓冲液（20+80）

4　 顺丁烯二酸色谱图

 

迪马“毒淀粉”中顺丁烯二酸（酐）检测解决方案

2012年，浙江省质量技术监督检测研究院采用迪马科技Platisil ODS C18液相色谱柱开发了基于高效液相色谱(HPLC)测定淀粉及其制品中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐总含量的方法。该方法的灵敏度高、准确度好、前处理操作简单，适用于淀粉及其制品中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐总含量的批量检测。
样品前处理
    称取2.50 g样品(精确至0.01 g)于50 mL比色管中(淀粉制品用粉粹机磨碎后称取)，加入25 mL体积分数5%的乙醇水溶液，涡旋2 min，超声提取10 min后用提取液定容至50 mL，摇匀，12000 r/min离心5 min后，过膜上机测定。
色谱条件
色谱柱：Platisil ODS C18，250 mm × 4.6 mm，5 μm (Cat.#：99503)
流动相：甲醇-1‰磷酸溶液(2∶98)
流速：1.0 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：15 μL
检测器：UV 214 nm
 
色谱柱的选择
   参考标准GB 25544－2010及有关马来酸的文献报道，为减少目标物出峰时间附近物质的干扰，延长其色谱保留时间，本方法采用Platisil ODS C18色谱柱，与普通ODS C18柱相比，该色谱柱可以纯水为流动相。
 

顺丁烯二酸标准品色谱图

含顺丁烯二酸阴性样品加标的谱图

海能仪器对“毒淀粉”中顺丁烯二酸（酐）推出的检测解决方案

 由于顺丁烯二酸在水中良好的溶解性（788g/L）,其前处理基质组分也不复杂，所以，其前处理提取方式较为简单，另顺丁烯二酸在紫外检测器中具备相应良好响应（其定量限可达250ug/mL），总体说明：此方法前处理操作简单，灵敏度高，稳定性好，适用于淀粉及其制品中顺丁烯二酸（酐）含量的测定。
 
实验部分
主要仪器与试剂：
仪器：海能LC7000高效液相色谱仪
      配置：LC7011二元高压泵
LC7020紫外/可见检测器
LC7031 柱温箱
7725i手动进样器
Hanon-Clarity色谱工作站
 
试剂：顺丁烯二酸标准品（浓度99.5%以上）、乙腈（色谱纯）、超纯水、磷酸（分析纯）

色谱条件
色谱柱： C18，250 mm × 4.6 mm，5 μm
流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(3∶97)
流速：1.0 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：15 μL
波长： 215 nm

标样制备：
 称取0.05g顺丁烯二酸标准品（精确到0.1mg），用超纯水定容在25mL容量瓶中，得到2mg/mL的标准液
 
样品前处理
    称取5 g样品(精确到0.01 g)于50 mL比色管中(样品磨碎后称取)，加入40 mL的超纯水，超声提取12 min后用超纯水定容至50 mL，放入冰箱至-5摄氏度环境中静置5min,放入离心机离心5 min后，用0.45um水滤膜过滤后进样测试。
 
 
图例
 
以下是使用海能LC7000高效液相色谱系统在淀粉中加入顺丁烯二酸标准品测试的结果，谱图中的主峰为顺丁烯二酸，与其他的杂质分离度良好，响应值高，完全适合在实验室中做批量测试应用。
 

上海伍丰顺丁烯二酸完整检测方法

伍丰建立了一种快速检测淀粉中顺丁烯二酸的高效液相色谱方法。确定的实验条件为:利用1 0%的乙醇提取样品,采用Shim-packVP-ODS柱(4.6 mm×1 50 mm,5μm),柱温3 0℃,检测波长2 20 nm,采用十六烷基三甲基溴化铵磷酸缓冲液与8 0%乙腈的混合物(体积比为8 0∶2 0)为流动相,流速1.0 mL/min。在确定的实验条件下,顺丁烯二酸在5～100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999,平均回收率为9 8.56%,RSD=1.70%。本方法灵敏度高,结果准确、可靠,可以用于淀粉中顺丁烯二酸的含量检测。